杨梅iPBS-PCR反应体系的建立与优化  

作　　者：郭志海[1,2] 王鹏凯[1,2] 郄红丽[1] 黄颖宏[1] 费艳[1] 

机构地区：[1]江苏省太湖常绿果树技术推广中心,江苏苏州215107 [2]苏州农业职业技术学院,江苏苏州215008

出　　处：《江苏农业科学》2015年第11期51-54,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(12)2011];江苏省科技支撑计划(编号:BE2012361);国家公益性行业(农业)科研专项(编号:20120389);江苏省农业三新工程[编号:SXGC(2014)076]

摘　　要：利用已报道的i PBS引物2249和3个杨梅品种的DNA为模板进行i PBS-PCR扩增,采用单因素法对杨梅i PBS-PCR反应体系的4个组分(d NTP、Mg^(2+)、引物、模板)用量进行优化,确定了杨梅i PBS-PCR 20μL反应体系:2μL 10×Taq buffer,1.6μL 25 mmol/L Mg^(2+),1.6μL 2.5 mmol/L d NTP,1μL 10μmol/L引物,0.2μL 5 U/μL Taq酶,30 ng模板DNA。梯度PCR试验表明可以参考i PBS引物Tm值确定退火温度。利用上述体系对随机取样的10个品种用4条i PBS引物进行扩增,得到了条带清晰、多态性好的i PBS谱带。

关 键 词：杨梅 iPBS-PCR 体系优化 

分 类 号：S667.601[农业科学—果树学]