捻转血矛线虫HSP60原核表达及特性分析  

作　　者：王芳[1] 李珂[1] 徐立新[1] 宋小凯[1] 李祥瑞[1] 严若峰[1] 

机构地区：[1]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095

出　　处：《畜牧与兽医》2015年第11期76-80,共5页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家973基础研究计划(2015CB150300);中央高校基本科研业务费自主创新重点项目(KYZ201315)

摘　　要：根据Gen Bank公布的捻转血矛线虫热休克蛋白60(HSP60)基因序列,设计一对特异性引物,以捻转血矛线虫总RNA为模板,通过RTPCR技术扩增出一条约为1 700 bp的DNA片段,将该片段克隆到p MD19-T载体上进行序列分析,结果显示该片段长1 710 bp,编码569个氨基酸。将该基因片段亚克隆到p ET32a(+)载体上,转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE显示,该基因成功表达,其融合蛋白分子量为80.7 ku,主要分布于菌体上清中。Western blot结果显示该重组蛋白可被人工感染捻转血矛线虫山羊血清所识别。Real-time PCR分析显示,HSP60基因在第三期幼虫和活化第三期幼虫中的相对表达量分别为1.0和0.88。本文探讨捻转血矛线虫HSP60功能奠定了基础。

关 键 词：捻转血矛线虫 热休克蛋白60 抗原特性 基因差异性表达 

分 类 号：S852.7[农业科学—基础兽医学]