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作 者:马勇[1] 包红梅[1] 王文超[1,2] 孙佳善[1] 赵玉辉[1] 王秀荣[1] 陈化兰[1]
机构地区:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/国家禽流感参考实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳110161
出 处:《中国预防兽医学报》2015年第12期899-902,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine
基 金:国际合作项目(2014DFR31360);自然基金项目(31470127)
摘 要:为鉴定与禽流感病毒(AIV)NS1蛋白相互作用的宿主蛋白,本研究以AIV GD1322株感染人肺泡上皮细胞(A549),利用NS1蛋白的单克隆抗体(MAb)进行免疫沉淀反应(IP)筛选与其结合的宿细胞蛋白,并经质谱鉴定确认膜联蛋白A2(ANXA2)与NS1蛋白之间可能存在相互作用关系。免疫共沉淀(Co-IP)试验结果显示ANXA2与NS1蛋白之间具有稳定的相互作用关系;而且,Pull-down试验证明ANXA2与NS1蛋白之间为直接的相互作用。此外,激光共聚焦试验表明NS1和ANXA2共定位于胞浆中。本研究首次鉴定AIV NS1蛋白与宿主蛋白ANXA2间存在相互作用,为进一步研究AIV NS1蛋白的功能奠定了基础。To identification of cellular protein interacting with the NS1 protein of avian influenza virus (AIV), the host Annexin A2 (ANXA2) protein was screened from AIV GD1322 (H5N1) strain infected A549 cells by the immune precipitation (IP) with anti-NS1 antibody and identified by mass spectrum. The results indicated that the NS1 protein was able to interact with ANXA2. Moreover, the interaction of the NS1 and ANXA2 was further confirmed by co-immunoprecipitation and pull-down tests. The NS1 and ANXA2 were co-localized in cytoplasm observed under the laser scanning confocal microscope. These results demonstrated that ANXA2 was a host protein interacting with AIV NS1.
关 键 词:禽流感病毒 NS1蛋白 ANXA2蛋白 蛋白互作
分 类 号:S852.65[农业科学—基础兽医学]
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