硫化氢、同型半胱氨酸和环格列酮对胱硫醚-γ-裂解酶基因及蛋白表达的影响  

Effects on the expression of cystathionine gamma-lyase m RNA and protein by sodium hydrosulfide,homocysteine and ciglitazone

作　　者：刘会娟[1] 雍小兰[1] 何冠军[2] 罗丽君[2] 胥正敏[2] 周春阳[2] 

机构地区：[1]中国人民解放军成都军区总医院临床药学科 [2]川北医学院药学院药物研究所

出　　处：《中国临床药理学与治疗学》2015年第11期1250-1255,共6页Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics

基　　金：四川省教育厅(13ZA0231)

摘　　要：目的:探讨硫化氢、同型半胱氨酸及环格列酮对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)基因及其蛋白表达的影响。方法:应用不同浓度的硫氢化钠(300、1 000μmol/L)、同型半胱氨酸(10、100、1 000μmol/L)及环格列酮(10、100μmol/L)作用于HUVEC,48 h后提取细胞总RNA,应用荧光定量PCR(realtime fluores-cence quantitative PCR,RTFQ PCR)及蛋白质印迹技术(Western blot)检测CSE基因和蛋白表达的变化。结果:硫氢化钠在生理浓度(300μmol/L)时可增加HUVEC CSE基因及蛋白的表达(P<0.05)。高浓度同型半胱氨酸引起HUVEC CSE基因及蛋白表达减弱(P<0.05)。环格列酮适宜浓度(10μmol/L)时也可增加HUVEC CSE基因及蛋白的表达(P<0.05)。结论:高浓度同型半胱氨酸对细胞水平上CSE的转录与翻译有抑制作用。从基因水平和蛋白质水平检测发现硫化氢和环格列酮可以调节CSE的转录与翻译,并可逆转高浓度同型半胱氨酸对CSE的作用。AIM：To explore the effects on the expression of cystathionine gamma-lyase mRNA and protein to human umbilical vein endothelial cells（HUVEC） cultured in vitro with sodium hydrosulfide,homocysteine and ciglitazone.METHODS;The HUVEC was cultured with NaHS（an H_2S donor 300,1000 μmol/L）,Hcy（10,100,1 000μmol/L）,and with ciglitazone（an PPAR-γactivator,10,100 μmol/L） separately.After being treated for 24 hours,the total RNA was extracted,the changes of the levels of HUVEC CSE mRNA and protein were detected using realtime quantitative PCR and Western blot.RESULTS：The levels of HUVEC CSE mRNA and protein were increased treated with 300 μmol/L NaHS and 10 μmol/L ciglitazone（P〈0.05）.The levels of HUVEC CSE mRNA and protein were decreased with high concentration Hcy（P〈0.05）.CONCLUSION：The lvels of CSE transcription and translation are inhibited with high concentration Hey.Hydrogen sulfide and ciglitazone can regulate the CSE transcription and translation at gene and protein level,and reverse the effect of high concentration Hey on CSE.

关 键 词：硫化氢 同型半胱氨酸 过氧化物酶体增殖激活受体 环格列酮 胱硫醚-Γ-裂解酶 

分 类 号：R965.2[医药卫生—药理学]