链球菌蛋白G的结构域重构、表达及鉴定  

RECONSTRUCTION, EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF A STREPTOCOCCAL PROTEIN G DOMAIN

作　　者：许瑞[1] 赵登云[1] 洪炀[1] 陆珂[1] 李浩[1] 林矫矫[1,2] 冯金涛[1] 徐玉梅 朱传刚[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室,上海200241 [2]江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州225009 [3]上海徐汇区中心医院,上海200031

出　　处：《中国动物传染病学报》2015年第5期46-52,共7页Chinese Journal of Animal Infectious Diseases

摘　　要：链球菌蛋白G(streptococcal protein G,SPG)具有与多种动物IgG结合的特性。本研究对链球菌蛋白G进行生物学分析,设计重组蛋白G的基因序列,构建重组蛋白G的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,得到带有GST标签的融合蛋白,通过GST亲和层析纯化蛋白。Western blot结果显示,重组蛋白具备与IgG结合的能力。ELISA测定重组蛋白与牛、山羊、兔、鼠4个物种IgG的亲和力,显示重组蛋白G的亲和力普遍高于商品化链球菌蛋白G。本研究成功重构并表达、纯化了链球菌重组蛋白G,得到其与4个物种抗体IgG的亲和力常数,有助于SPG在其他相关研究中的应用。Streptococcal protein G can bind to Fc domain of IgG of many species. This function has been widely applied in immunological experiments. In the present study, the genetic fragment coding for streptococcal protein G（SPG） was subcloned into p GEX-2T and then GST-taggged fusion protein was expressed in Escherichia coli BL21 cells. The recombinant SPG（r SPG） showed the ability to bind with IgG in Western blot and even higher affinity for IgG of four animal species（cattle, goats, rabbits and mice） in ELISA than commercially available SPG. The results demonstrated that the r SPG was an excellent tool for the usage in IgG related studies.

关 键 词：链球菌蛋白G 重组 亲和力常数 

分 类 号：S852.616[农业科学—基础兽医学]