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机构地区:[1]河北省唐山市工人医院呼吸内科,063000 [2]华北理工大学基础医学院病理学系,河北唐山063000
出 处:《广东医学》2015年第23期3604-3607,共4页Guangdong Medical Journal
基 金:国家自然科学基金资助项目(编号:81072254);河北省唐山市医疗卫生创新人才培养项目(编号:14130275B)
摘 要:目的探讨AKT通路在转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用,及硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对此作用的影响。方法体外培养肺成纤维细胞,随机分为4组:(1)对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液孵育培养;(2)TGF-β_1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β_1(5μg/L)孵育细胞;(3)TGF-β_1+转染对照组:空质粒载体转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β_1(5μg/L)孵育细胞;(4)TGF-β_1+Prx-1转染组:Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β_1(5μg/L)孵育细胞。脂质体转染法将Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞,Western blot法检测Prx-1、Ⅰ和Ⅲ型胶原、磷酸化AKT(p-AKT)表达,二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平。结果 (1)Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞后,Prx-1蛋白表达高于TGF+β_1+转染对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)与对照组比较,TGF-β_1组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS水平及p-AKT蛋白表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与TGF-β_1组比较,TGF-β_1+转染对照组的Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT水平无明显变化(P>0.05),但TGF-β_1+Prx-1转染组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT蛋白水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β_1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并由此促进AKT的激活和肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β_1的作用。
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