基于高内涵技术的20种中药提取物对β淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞损伤保护作用研究  

Protection of 20 Chinese materia medica extracts to Aβ_(25-35)-induced SH-SY5Y cell injury using high content screening

作　　者：王俨如 陶晓倩[1,2] 胡玉梅[1,2] 李娜[1,2] 曹亮[1,2] 刘文君[1,2] 丁岗[1,2] 王振中[1,2] 萧伟[1,2] 

机构地区：[1]江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001 [2]中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001

出　　处：《中草药》2016年第2期267-274,共8页Chinese Traditional and Herbal Drugs

基　　金：国家科技部重大新药创制项目(2013ZX09402203)

摘　　要：目的应用高内涵(HCS)技术快速筛选对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)致SH-SY5Y细胞损伤模型有保护作用的中药提取物。方法选取20种中药饮片,每种药材分别进行20%、40%和95%乙醇提取,以Aβ25-35损伤的SH-SY5Y细胞为模型,采用Hoechst33342和PI双染,并利用HCS技术观察60个提取物对模型细胞的保护作用;在此基础上进一步观察活性提取物对模型细胞Caspase-3/7活性的影响,快速筛选对阿尔茨海默病(AD)有潜在治疗作用的中药提取物。结果 HCS筛选发现,在60个提取物中,有17个提取物对模型细胞具有较好的保护作用;进一步研究显示,其中有8个提取物对模型细胞Caspase-3/7活性有较好的抑制作用。并且以刘寄奴40%乙醇部位及丹参20%、40%乙醇部位效果最优。结论以荧光标记为基础的HCS技术是有效、快速筛选对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞损伤模型有保护作用中药提取物的分析方法,筛选出的中药提取物具有潜在的抗AD活性。Objective To identify neuroprotective extracts with the protective effects on Aβ25-35-induced SH-SY5 Y cell injury via high content screening（HCS）. Methods Hoechst 33342/PI double staining method was used to screen neuroprotective extracts from 60 Chinese materiamedica（CMM） extracts. Further more, theeffects of neuroprotective extracts on Aβ25-35-induced changes in the levels of Caspase-3/7 were detected. Results The results showed that 17 extracts had obviously neuroprotective effects. Among the 17 extracts, 8 of them inhibited Aβ25-35-induced up-regulation of Caspase-3/7. Conclusion HCS is an efficient method to screen neuroprotective extracts withthe protective effects of Aβ25-35-induced SH-SY5 Y cell injury. The neuroprotective extracts have potential medicinal value in Alzheimer＇s disease.

关 键 词：高内涵筛选 中药提取物 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 SH-SY5Y细胞 凋亡 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]