原代脐静脉内皮细胞NFKB1基因启动子区缺失型较插入型P50蛋白表达降低  

作　　者：周韵[1,2] 杜冬梅[3] 罗俊一[1,2] 李芳[4] 古丽那孜.穆哈提 陈小翠[1,2] 马依彤[1,2] 杨毅宁[1,2] 

机构地区：[1]新疆医科大学第一附属医院心脏中心,新疆乌鲁木齐830054 [2]新疆医科大学第一附属医院心血管重点实验室,新疆乌鲁木齐830054 [3]博州精河县人民医院内一科,新疆博州833300 [4]新疆医科大学第一附属医院妇科,生殖助孕中心,新疆乌鲁木齐830054

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2016年第3期352-355,359,共5页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金(81460069)

摘　　要：目的探讨核因子κB1基因(NFKB1)启动子区-94位点插入/缺失ATTG碱基(-94ins/del ATTG)多态性在氧化应激中对人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)NF-κB信号通路中P50、P65水平的影响。方法分离并培养HUVEC,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)法将HUVEC分为插入型(Ⅱ型)、缺失型(DD型)以及杂合子型(ID型),并依据其基因型分型在空白组及H2O2诱导组中分为Ⅱ型、ID型、DD型3个亚组;H2O2建立HUVEC氧化应激模型,采用CCK-8法检测细胞增殖活性选取最适宜的H2O2诱导浓度及时间;Western blot法检测各组HUVEC总蛋白及核蛋白P50、P65蛋白水平。结果共收集23例HUVEC,其中Ⅱ型8例、ID型9例、DD型6例;CCK-8试剂盒确定H2O2诱导浓度为200μmol/L,诱导时间为12 h;在空白组及H2O2诱导组中纯合子DD型P50蛋白水平均较Ⅱ型显著降低。结论 NFKB1(rs28362491)基因多态性对P50蛋白表达影响显著。

关 键 词：核因子κB(NF-κB) 脐静脉内皮细胞 NFKB1 P50 氧化应激 H2O2 

分 类 号：R392.33[医药卫生—免疫学] R541.4[医药卫生—基础医学]