河北核桃ISSR反应体系的建立  

作　　者：雷玲 王红霞[2] 高仪[3] 张志华[2] 

机构地区：[1]河北省赞皇县林业旅游局,051230 [2]河北农业大学山区研究所 [3]河北农业大学园艺学院

出　　处：《河北果树》2016年第2期5-7,共3页Hebei Fruits

基　　金：国家科技支撑计划项目(2006BAD01A17)

摘　　要：以3个河北核桃样品为材料,对ISSR反应体系中的主要影响因子DNA模板浓度、引物浓度、DNA聚合酶用量、退火温度进行优化筛选。最后确定河北核桃ISSR-PCR反应体系为20 L体系中含10×PCR Buffer(Mg2+Plus)2 L,d NTPs(各2.5 m M)1.6 L,DNA聚合酶1.0 U,引物25 M,模板DNA 50 ng。反应的基本程序为:94℃预变性5 min(1个循环),然后94℃变性30 s,52℃退火60 s,72℃链延伸60 s(32个循环),72℃延伸10 min(1个循环),4℃保持。不同引物间适宜的退火温度不同。通过对影响ISSR反应体系的主要因子进行优化筛选,建立了适合河北核桃ISSR分析的反应体系,为进一步开展河北核桃指纹图谱、遗传多样性及品种鉴定等的研究奠定基础。

关 键 词：河北核桃 反应体系 

分 类 号：S664.1[农业科学—果树学]