SIRT1信号通路介导紫檀芪抗内皮细胞抗缺血再灌注损伤的机制研究  

Pterostilbene alleviates HUVECs ischemia reperfusion injury via activating SIRT1and suppressing cell apoptosis

作　　者：冯笑[1] 杨阳[2] 熊红燕[1] 范崇熙[3,4] 狄守印[3,4] 胡伟[5] 段维勋[1] 梁洪亮[1] 金振晓[1] 俞世强[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院心血管外科,西安710032 [2]第四军医大学预防医学系,西安710032 [3]西安市中心医院胸心外科,陕西西安710003 [4]第四军医大学唐都医院胸外科,陕西西安710038 [5]第四军医大学生物医学工程系,陕西西安710032

出　　处：《中国体外循环杂志》2016年第1期49-54,共6页Chinese Journal of Extracorporeal Circulation

基　　金：国家自然科学基金(81570231;81570230;81570232;81470415;81270170;81200151;81470411);陕西省国际科技合作与交流计划项目(2015KW-047);陕西省社会发展公关计划(2015SF104;2012K15-02-01);陕西省科技统筹创新工程计划项目(2013KTCL03-01);陕西省自然科学基金(2014JM4106);西京医院学科助推计划(XJZT14203;XJGX12C11;XJGX13LC15)

摘　　要：目的研究不同浓度紫檀芪(PTE)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的机制。方法 HUVECs经1μM/L和2μM/L的PTE处理后,接受模拟缺氧复氧(SIR)损伤(缺氧70 min,复氧4 h),采用CCK-8法检测细胞活力,使用酶活性测定法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)的释放量和超氧化物歧化酶(SOD)的水平,使用westernblot法检测SIRT1、Ac-FOXO1、Bax和Bcl-2的表达情况,使用SIRT1阻断剂EX527观察SIRT信号通路在这一过程中发挥的作用。结果 SIR处理可以抑制HUVECs活性,抑制SIRT1表达,上调Ac-FOXO1表达,下调Bcl-2/Bax比例(与Control组比较,P<0.05)。细胞培养基中MDA含量上升,SOD水平下降(与Control组比较,P<0.05)。1μM/L和2μM/L的PTE处理均可以发挥细胞保护作用,提高细胞活力,降低了MDA水平,提高了SOD水平(与SIR组比较,P<0.05)。此外,PTE处理上调了SIRT1表达,抑制了Ac-FOXO1表达,并且提高Bcl-2/Bax比例(与SIR组比较,P<0.05)。EX527处理后细胞活力下降,凋亡增加(与SIR+PTE组比较,P<0.05)。结论 PTE可以保护HUVECs抵抗缺血再灌注损伤,其机制是激活SIRT1/FOXO1保护性信号通路,抑制HUVECs凋亡。Objective To explore the effect of pterostilbene on simulated ischemia reperfusion（SIR） injury of HUVECs andthe roles of SIRT1 in this process.Methods The cultured HUVECs, pretreated with PTE（1 or 2 μM/ L） for 2h, were subjected toSIR. Then cell counting kit-8 was used to detect cell viability, and specialized kits were used to detect the concentration of malondial-dehyde（MDA） and superoxide dismutase（ SOD） in the cell culture medium. The expression of Silent information regulator 1（SIRT1）, Acetylated fork head transcription factor 1（Ac-FOXO1）, Bcl-2 and Bax were quantified using western blotting. The spe-cific inhibitor of SIRT1 EX527 was used to investigate the roles of SIRT1 in this process.Results SIR treatment reduced cell viabilitysignificantly（from 1.219±0.021 to 0.593±0.036）, down-regulated SIRT1 expression, up-regulated Ac-FOXO1 expression and re-duced the Bcl-2/ Bax ratio（vs the control group,P〈0.05）. Both 1μM/ Land 2 μM/ L PTE increased the cell viability（to 0.762±0.029和 0.860±0.019）, down-regulated the MDA level（to 14.16±1.62 and 11.23±1.35） and up-regulated the SOD level（to 64.16±3.97 and 86.06±5.48）（vs the SIR group,P〈0.05）. Western blot analysis showed that SIRT1 expression increased and Ac-FOXO1 ex-pression decreased. The Bcl-2/ Bax ratio was increased（vs the SIR group,P〈0.05）. EX527 treatment reduced the cell viability（from0.743±0.031 to 0.6140±0.025）（vs the SIR＋PTE group,P〈0.05）.Conclusion PTE treatment may activate SIR injury through acti-vating SIRT1-Ac-FOXO1 pathway and suppressing cell apoptosis.

关 键 词：紫檀芪 人脐静脉内皮细胞 缺血再灌注损伤 沉默信息调控因子1 

分 类 号：R54[医药卫生—心血管疾病]