ICF45单克隆抗体的制备及其鉴定  

作　　者：伊力亚尔.尼加提 王珊珊[1] 王俊坡 商瑜[1] 何大澄[1] 

机构地区：[1]北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室,北京100875

出　　处：《生物技术世界》2016年第5期5-7,共3页Biotech World

基　　金：高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20120003120025);国家重点基础研究发展计划项目(2011CB915504);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2013NT31)

摘　　要：本研究利用RT-PCR的方法扩增出人ICF45基因片段并将其构建至原核表达载体p ET-30a,随后将此质粒转化,用IPTG诱导大量表达ICF45蛋白。利用纯化的ICF45蛋白免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,采用间接酶联免疫ELISA筛选阳性克隆,最终获得了2株分泌ICF45抗体的杂交瘤细胞。Western Blot、免疫荧光和免疫组化结果均显示其分泌的抗体能特异性识别ICF45蛋白,并且该抗体灵敏度高、特异性强。本研究获得的ICF45单克隆抗体,为深入阐明ICF45在人类细胞周期调控和肿瘤发生发展中的作用机制提供了重要的工具。

关 键 词：ICF45 蛋白纯化 单克隆抗体 ELISA 

分 类 号：Q28[生物学—细胞生物学]