A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定  

作　　者：颜健华[1] 兰宗宝[2] 何奇松[1] 蒋家霞[1] 冯淑萍[1] 黄胜斌[1] 韦达有 易春华 许瑞胜 梁晟[1] 熊毅[1] 

机构地区：[1]广西动物疫病预防控制中心,南宁530001 [2]广西农业科学院农业科技信息研究所,南宁530007 [3]桂林市动物疫病预防控制中心,广西桂林541002 [4]崇左市动物疫病预防控制中心,广西崇左532200

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2016年第4期167-171,共5页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0779001)

摘　　要：为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白p ET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白p GEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价。将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7。结果表明:这4株单克隆抗体均为Ig M亚型和κ轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大。4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合。说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体。

关 键 词：A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定 竞争ELISA法 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学] Q785[农业科学—兽医学]