麦胚凝集素慢病毒载体的构建及其表达的研究  

Study on the construction and expression of lentivirus-wheat germ agglutinin expressing vector

作　　者：王娟[1] 张连国[2] 马云[3] 卞伟华[4] 

机构地区：[1]滨州医学院药学院细胞工程教研室,烟台264003 [2]滨州医学院附属医院胸外科 [3]滨州医学院附属医院中心实验室 [4]滨州医学院药学院细胞生物学教研室

出　　处：《滨州医学院学报》2016年第2期92-95,共4页Journal of Binzhou Medical University

基　　金：国家自然科学基金(31401258);山东省自然科学基金(ZR2012BM006)

摘　　要：目的探讨麦胚凝集素慢病毒载体的构建与表达的方法。方法采用基因工程方法,将麦胚凝集素的基因插入慢病毒表达载体Plvx-IRES-ZsGreen1中。再采用慢病毒包装,将构建好的质粒和其他三种包装质粒(RPEV、PRRE、VSVG)在293T细胞中进行共转染,获取病毒液后感染人源的脂肪干细胞(ADSC)。结果显微镜下显示绿色荧光报告蛋白表示感染成功。对感染后的脂肪干细胞运用免疫染色技术进行显色,结果显示麦胚凝集素已经成功在脂肪干细胞中实现表达。结论慢病毒包装WGA蛋白的方法可靠高效,可作为一种高效的示踪技术广泛应用于各类细胞。Objective To investigate the construction and expression of wheat germ agglutinin lentivirus expression vector.Methods By using genetic engineering methods,The WGA gene were inserted into a lentivirus expression vector Plvx IRESZsGreen1.Then the recombinant plasmid and three other kinds of packaging plasmid（RPEV,PRRE and VSVG）were used to co-transfect with 293 Tcells till getting the virus and then infected the human adipose tissue-derived stem cells（ADSCS）.After that,we dyed the ADSC by using immunofluorescence technique.Results The results showed that the WGA protein was expressed successfully in adipose stem cells.Conclusions The method of packaging WGA protein in lentivirus is reliable and efficient,which could be used for the next step of tracer experiment.

关 键 词：麦胚凝集素 慢病毒载体 免疫荧光染色 脂肪干细胞 

分 类 号：Q812[生物学—生物工程]