补阳还五汤联合MSCs移植对脑缺血再灌注模型大鼠VEGF及信号通路的影响  

作　　者：张运克[1,2] 张振强[1] 宋军喜 

机构地区：[1]河南中医学院,河南郑州450046 [2]河南中医学院第一附属医院,河南郑州450000

出　　处：《时珍国医国药》2016年第4期806-809,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(No.81072799/H2708)

摘　　要：目的揭示补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(MSCs)移植促进脑缺血血管新生的机制。方法选取雄性SD大鼠96只,随机分为脑缺血再灌注模型组、内皮细胞抑制素组、MSCs移植组及补阳还五汤联合MSCs移植组。参照改良的Longa法建立大鼠脑缺血再灌注模型(MCAO)。模型组在立体定位仪下,用微量进样器通过侧脑室给予生理盐水10μl;抑制素组给予内皮细胞抑制素阿瓦斯汀5μl,生理盐水5μl;MSCs组及联合组给予阿瓦斯汀5μl、培养的MSCs 5μl。联合组术前3天给予补阳还五汤(10ml/kg)灌胃,其它各组以同等体积的生理盐水灌胃,每日一次。模型组、抑制素组及MSCs组48 h后,采集实验动物血清和脑组织;联合组分别于12h、24h、36h、48h采集,采用免疫组化法检测大鼠血清VEGF及缺血脑组织VEGF的表达;应用免疫印迹蛋白法检测VEGFR2、p-VEGFR2、ERK、p-ERK、AKT、p-AKT的蛋白含量。结果抑制素组与模型组相比,大鼠血清及脑组织VEGF含量明显降低(P<0.05);ERK、AKT含量变化不大(P>0.05);VEGFR2、p VEGFR2、p ERK和p AKT表达均显著下降(P<0.05)。MSCs组与抑制素组相比,大鼠血清及脑组织VEGF含量明显升高(P<0.05);ERK、AKT含量影响不大(P>0.05);VEGFR2、p-VEGFR2、p-ERK和p-AKT表达均升高(P<0.05);联合组与抑制剂组相比,除ERK外,所有指标均有升高,以24h、36h、48h三个时间点最为明显(P<0.05、P<0.01)。结论内皮细胞抑制素(阿瓦斯汀)可通过抑制VEGFR2及其磷酸化,降低ERK、AKT的磷酸化水平,阻止经MAPK途径的胞內信号转导途径,从而抑制内皮细胞的增殖和迁移,阻止新生血管的形成;MSCs组及联合组主要经VEGFR-2所介导的信号通路及PI3K/AKT信号途径,诱导内皮细胞增殖和迁移,促进血管新生,对ERK途径的胞內信号影响不大。

关 键 词：脑缺血再灌注 补阳还五汤 骨髓间充质干细胞 内皮细胞抑制素 血管新生 VEGF VEGFR P13K/AKT ERK 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]