鸭IL-8mRNA定量检测方法的建立及应用  

作　　者：王栋[1] 张焕容[1] 张冰[1] 岳华[1] 汤承[1] 

机构地区：[1]西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041

出　　处：《中国兽医杂志》2016年第4期54-57,共4页Chinese Journal of Veterinary Medicine

基　　金：中央高校基本科研业务费专项资金项目(2014ZYXS53;2014NZYQN58);四川省教育厅创新团队项目(13TD0057)

摘　　要：为检测鸭IL-8细胞因子表达,设计鸭IL-8基因特异性引物,以鸭组织总RNA为模板,建立了鸭IL-8 SYBR Green I荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法,应用该法检测了基因A型鸭甲肝病毒（Duck hepatitis A virus genotype A,DHAV-A）弱毒疫苗免疫SPF雏鸭肝、脾和脑组织中鸭IL-8 m RNA的动态表达。结果鸭IL-8基因RRT-PCR扩增标准曲线相关系数0.993,溶解曲线呈特异性单峰,线性范围10^-2-10^-9,Ct值范围7.81-30.71,最低检测量99.17 copies/μL,扩增效率1.08,组内和组间变异系数范围分别为0.67%-0.94%和0.96%-1.27%;鸭IL-8 m RNA在免疫鸭肝、脾和脑组织表达水平分别在第3天、第5天和第2天时间点达峰值,分别为对照组的2.75、35.29倍和10.79倍（P〈0.01）。本试验建立的鸭IL-8 RRT-PCR特异、敏感、稳定,能够快速、准确检测鸭体内IL-8细胞因子的表达水平。

关 键 词：鸭IL-8 荧光定量RT-PCR 基因A型鸭甲肝病毒 SPF雏鸭 弱毒疫苗 

分 类 号：S852.659.5[农业科学—基础兽医学]