钙调蛋白磷酸酶B亚基生物学活性检测方法建立  

作　　者：史新昌[1] 杨欢[2] 徐莉[1] 李翔[2] 黄宗文 韩宇东 魏群[2] 饶春明[1] 

机构地区：[1]中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京100050 [2]北京师范大学生命科学学院,北京市基因工程药物及生物技术重点实验室,北京100875 [3]海口奇力制药股份有限公司,海口570216

出　　处：《中国科学：生命科学》2016年第6期751-755,共5页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：“重大新药创制”科技重大专项(批准号:2012ZX09304010,2013ZX09102062);国家自然科学基金(批准号:31270849)资助

摘　　要：建立钙调蛋白磷酸酶B亚基（calcineurin subunit B,CNB）生物活性检定方法用以质量控制.CNB能促进钙调蛋白磷酸酶A亚基（CNA）的突变体CNAΔ316的活性,增强其分解底物对硝基苯磷酸二钠（p-nitrophenylphosphate,p NPP）的能力.采用四参数方程对不同浓度CNB和相应的p NPP最大分解速率进行拟合,用平行线分析法对供试品和参考品进行量值传递,得到供试品的活性值.然后对该方法的准确度、精密度、线性、线性范围、灵敏度、特异性和耐久性进行验证.回收率结果均在98%以上,板内精密度为6.7%,板间精密度为10.8%,决定系数大于0.98,线性范围为0.05~50μg/m L,灵敏度为50μg/m L.部分细胞因子无法促进CNAΔ316分解底物p NPP的能力.在一定范围内,CNAΔ316浓度对检测结果没有影响.

关 键 词：钙调蛋白磷酸酶B亚基 生物活性 方法建立 方法验证 质量控制 

分 类 号：Q5-33[生物学—生物化学]