猪传染性胃肠炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备与鉴定  

作　　者：胡景炎 王秋霞[1,2] 刘滔涛 陈欢利 涂宜强[1,2] 金俊杰[1,2] 白宇[1,2] 

机构地区：[1]温州科技职业学院,浙江温州325006 [2]温州市农业科学研究院,浙江温州325006

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2016年第7期177-179,281,共4页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划项目(2014R454001);浙江省公益性技术研究农业项目(2014C32046);浙江省教育厅科研项目(Y201432069)

摘　　要：为了制备猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）M蛋白的单克隆抗体（MAb）,试验利用原核表达融合蛋白His-M免疫7周龄雌性Balb/c小鼠,以PK-15细胞培养病毒液作为检测筛选抗原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果表明：获得2株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株（2G1、2G2）,经检测其细胞培养上清液和诱导的小鼠腹水抗体效价分别可达到1∶3200和1∶1×105;连续培养15代及液氮冻存后复苏,抗体效价稳定;单克隆抗体亚型鉴定均为IgG1,轻链均为k链;MAb能够特异性识别TGEV。

关 键 词：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) M蛋白 杂交瘤技术 间接ELISA法 免疫荧光测定 单克隆抗体(MAb) 高稳定性 高效价 强特异性 

分 类 号：S852.43[农业科学—基础兽医学]