磷酸肌醇信号通路在磷脂酰胆碱阳性伴放线放线杆菌粘附和侵袭过程中的作用  

Phosphoinositide signaling pathway is involved in cell adhesion and invasion of phosphorylcholine positive Aa

作　　者：王勤[1] 轩东英[1] 张雄[1] 钟德钰[1] 杨熙[1] 谢成婕[1] 刘伟珍[1] 章锦才[1] 

机构地区：[1]广东省口腔医院.南方医科大学附属口腔医院,广东广州510280

出　　处：《牙体牙髓牙周病学杂志》2016年第8期464-468,共5页Chinese Journal of Conservative Dentistry

基　　金：国家自然科学基金(81371151);广东省科技计划项目(2015110)

摘　　要：目的:探讨磷酸肌醇信号通路在磷脂酰胆碱(PC)阳性伴放线放线杆菌(Aa)粘附和侵袭人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)过程中的作用。方法:采用磷酸肌醇信号通路中磷脂酶C(PLC)与G蛋白偶联受体结合过程的抑制剂U73122及其无活性的类似物U73343预处理HUVECs,分别通过粘附侵袭实验观察Aa对细胞粘附和侵袭能力;MTT法检测Aa对不同预处理细胞损伤情况;Ca^(2+)荧光探针检测Aa侵袭过程中细胞内Ca^(2+)的动员情况。结果:与对照组相比,U73122预处理细胞后,PC阳性Aa的侵袭率降低至(12.62±2.10)%、细胞存活率升高、抑制了Ca^(2+)的增加(P<0.05),粘附率则无显著差异(P>0.05);U73343预处理细胞后,PC阳性Aa的侵袭率、粘附率、细胞存活率与非预处理组相比无统计学差异(P>0.05);U73122拮抗了Aa引起的Ca^(2+)向HUVECs内聚集(P<0.05)。结论:磷酸肌醇信号通路中G蛋白偶联受体与PLC的结合在PC阳性Aa的粘附、侵袭细胞和诱导细胞死亡的过程中发挥了重要作用。AIM： To investigate the role of phosphoinositide and calcium signaling pathway in the phosphorylcholine（ PC） positive Aggregatibacter actinomycetemcomitans（ Aa） adhesion and invasion into human umbilical vein endothelial cells（ HUVECs）. METHODS： Cultured HUVECs were pretreated with phospholipase C（ PLC） inhibitor U73122（ 5 μmol/L） and U73343（ 5 μmol/L）,the inactive analog of U73122 respectively,for 30 min. The cells were then infected with PC positive or negative Aa strains respectively for adhesion / invasion assay and MTT assay. The intracellular Ca^（2＋）mobilization during the process of PC positive Aa internalization into HUVECs after pretreatment was measured by fura- 2 / AM.RESULTS： U73122 treatment resulted in a decrease in PC positive Aa invasion into HUVECs by（ 12. 62 ± 2. 1） %（ P 0.05）. However,U73122 did not influence bacterial cell adhesion（ P 0.05）. U73343 treatment did not show significant effect on PC positive Aa invasion,survival and adhesion to HUVECs（ P 0. 05）. U73122 almost completely inhibited the increase of Ca^（2＋）into HUVECs sstimulated by Aa. CONCLUSION： Platelet activating factor- receptor triggered PLC activation is involved in the process of PC positive Aa adhesion and invasion to HUVECs.

关 键 词：伴放线放线杆菌 磷脂酶C 磷脂酰胆碱 血小板活化因子受体 

分 类 号：R780.2[医药卫生—口腔医学]