荧光定量PCR方法快速检测人肠道病毒埃可30的研究  

作　　者：易丽娜[1] 郑焕英[2] 肖红[2] 曾汉日[2] 陆靖[1] 

机构地区：[1]广东省疾病预防控制中心广东省公共卫生研究院,广东广州511430 [2]广东省疾病预防控制中心

出　　处：《华南预防医学》2016年第4期386-389,共4页South China Journal of Preventive Medicine

基　　金：广东省科技计划项目(2014A020212243)

摘　　要：目的建立特异、快速、灵敏的人肠道病毒埃可30(ECHO30)核酸检测的荧光定量PCR方法。方法应用Clustal W软件分析ECHO30基因序列,设计特异性引物和Taq Man探针,研制ECHO30病毒实时荧光定量PCR方法。与巢式PCR方法比较,确定方法的灵敏性,并利用数字PCR定量该方法的检测下限。同时通过对广东省内主要流行的其他肠道病毒株的检验,确定方法的特异性。结果本研究建立的方法能特异性扩增ECHO30核酸,与巢式PCR方法比较,灵敏度高,检测下限低至27.7 copies/μL;且与广东省内主要流行的其他肠道病毒株(肠道病毒71型和柯萨奇病毒A6、A10、A16)均无交叉反应。该方法无论对高浓度还是低浓度样本偏差均很小,具有很好的重复性。结论本研究建立的荧光定量PCR是一种能快速、灵敏、特异检测ECHO30的方法,适用于临床早期诊断。

关 键 词：人肠道病毒埃可30 荧光定量PCR TAQMAN探针 

分 类 号：R446.5[医药卫生—诊断学] R511[医药卫生—临床医学]