双黄连注射剂中连翘酯苷A致敏家兔后血清中特异性抗体的测定  

作　　者：胡宗苗 张恩户[1] 刘继平[1] 周园里 邓颖颖[1] 陈世忠[2] 

机构地区：[1]陕西中医药大学药理教研室,陕西咸阳712046 [2]北京大学药学院天然药物学系,北京100083

出　　处：《中成药》2016年第9期2045-2048,共4页Chinese Traditional Patent Medicine

基　　金：北京市自然基金资助项目(14G60188)

摘　　要：目的 ELISA法检测双黄连注射剂中小分子半抗原物质连翘酯苷A致敏家兔血清中的特异性抗体效价。方法取新西兰种家兔,自耳中心动脉采血10 m L,制备致敏前血清。将连翘酯苷A与家兔血清体外孵育,制成连翘酯苷A-血浆蛋白完全抗原。将完全抗原皮下注射以免疫动物,1月内共5次。末次注射后7 d,麻醉动物,自腹主动脉取血,制备血清,即为连翘酯苷A-血浆蛋白全抗原的抗血清,用ELISA法检测抗血清的抗体效价(D值)。若1∶128稀释血清的D值大于致敏前血清D值的2倍,即可判定产生了外源性抗体。用间接竞争ELISA法测定家兔抗血清的特异性抗体,并绘制抑制曲线,以证明其抗体是由连翘酯苷A-血浆蛋白特应性产生的。由于药物引起过敏反应与产生Ig E型抗体有关,因此采用兔免疫球蛋白E(Ig E)ELISA试剂盒检测家兔抗血清中Ig E抗体的含有量。结果抗体效价测定结果表明,连翘酯苷A的抗体效价高于致敏前血清D值的两倍,说明连翘酯苷A有潜在的致敏性。间接竞争ELISA测定抗体特异性结果表明,连翘酯苷A免疫后的家兔抗血清中的抗体具有一定的特异性。Ig E型抗体浓度的测定结果表明,经过多次免疫后的家兔体内产生了外源性Ig E型抗体。结论连翘酯苷A在此实验条件下对家兔有致敏性。

关 键 词：连翘酯苷A 双黄连注射剂 ELISA法 免疫球蛋白E 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]