耐药性大肠杆菌整合子整合酶的克隆与表达  

作　　者：贾芳[1] 杨江流[1] 宋青山[1] 

机构地区：[1]河套学院,内蒙古巴彦淖尔015000

出　　处：《黑龙江畜牧兽医（下半月）》2016年第7期122-124,共3页

基　　金：内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJZY14332)

摘　　要：为获得纯化的大肠杆菌Ⅰ类整合子整合酶,采用PCR技术扩增目的基因,将目的基因克隆到pEASY-T1载体上测序,测序结果与NCBI上公布的耐药性大肠杆菌Ⅰ类整合子整合酶基因完全一致后,再将目的基因克隆到表达载体pEASY-E1 Expression上,将表达质粒载体转化于rosetta感受态细胞中诱导表达,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western-blot)检测分析。结果表明:表达产物分子量为33 ku,与耐药性大肠杆菌Ⅰ类整合子整合酶分子量一致,为进一步测定酶的活性提供物质基础。

关 键 词：大肠杆菌 整合子 整合酶 克隆与表达 PCR 

分 类 号：S852.612[农业科学—基础兽医学] Q786[农业科学—兽医学]