中国实验用小型猪MC3R基因的CRISPR/Cas9敲除载体构建与验证  

作　　者：徐邢宾 钟洁[1] 李顺才[1] 郑李彬[1] 李秋艳[2] 张瑾[1,3] 

机构地区：[1]河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066000 [2]中国农业大学生物学院,北京100193 [3]嘉兴学院生化学院,浙江嘉兴314001

出　　处：《中国畜牧杂志》2016年第19期75-78,共4页Chinese Journal of Animal Science

基　　金：河北省杰出青年基金(C2014407083);农业部转基因重大专项(2014ZX08006-003);河北省高等学校创新团队领军人才培育计划(LJRC004);河北省出国留学人员资助项目(C2015003030)

摘　　要：黑素皮质素受体(melanocortin receptors,MCRs)属于G-蛋白偶联受体家族,在黑素皮质素(melanocortin)刺激下,通过c AMP启动胞内信号。MCRs各成员表达于不同类型细胞,生理作用迥异,其中MC3R在控制动物食欲和调节能量平衡中发挥重要作用,但作用机理不明。猪的采食与能量分配对猪生长速度、胴体瘦肉率等经济性状具有重要影响,对MC3R基因敲除的研究不仅可以用于明确MC3R的生理作用,还可以评估其在猪分子育种中的价值。本文采用新型基因组编辑技术CRISPR/Cas9系统,基于中国实验用小型猪(chinese experimental mini pig,CEMP)MC3R基因序列信息,在其起始密码子的上游12 bp和终止密码子下游45 bp设计靶位点,构建4个p X330MC3R基因敲除载体,以CEMP成纤维细胞为材料,验证4个载体均实现高效特异性切割,为构建MC3R基因敲除猪奠定了基础。

关 键 词：MC3R CRISPR/Cas9 基因敲除 猪 

分 类 号：S828.2[农业科学—畜牧学]