大豆中不同除草剂作用靶标酶的miRNA前体克隆  

作　　者：陶波[1] 刘洋[1] 李向勇[1] 金龙国[2] 邱丽娟[2] 

机构地区：[1]东北农业大学农学院,黑龙江哈尔滨150010 [2]中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室,北京100081

出　　处：《江苏农业科学》2016年第9期24-27,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家转基因生物新品种培育重大专项(编号:2013ZX08004-001)

摘　　要：对前人已预测的大豆miRNA的4个茎环结构进行引物设计、克隆miRNA前体,先将设计好的接头与大豆小RNA的3'末端连接,然后利用与接头序列互补的引物对小RNA进行反转录,即可得到加接头的第1链cDNA,再用基因特异引物GSP和通用接头引物的组合,经PCR扩增后即可捕获位于已知序列区和接头之间的3'端RNA序列。结合3'端引物的测序结果,初步预测成熟miRNA可能的6个组合是同一家族。

关 键 词：miRNA EPSPS(5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶) 基因序列 草甘膦 克隆 

分 类 号：S482.4[农业科学—农药学]