人血浆中依普利酮的LC-MS/MS测定研究  

Determination of eplerenone in human plasma by LC-MS/MS

作　　者：陈静[1] 潘春燕[1] 王璐[1] 马鹏程 杭太俊[1] 宋敏[1] 

机构地区：[1]中国药科大学药物分析教研室,南京210009 [2]中国医学科学院皮肤病医院,南京210042

出　　处：《药物分析杂志》2016年第11期1925-1930,共6页Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis

摘　　要：目的:建立测定人血浆中依普利酮浓度的LC-MS/MS方法,并应用于依普利酮片在中国健康人体内的药动学研究。方法:血浆采用EDTANa_2作为稳定剂,并用预冰水浴冷却乙腈沉淀蛋白处理样品;以0.05%甲酸0.1%醋酸铵溶液-0.05%甲酸甲醇溶液为流动相,线性梯度洗脱,采用Wondasil-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)进行分离;多反应离子监测[M+H]^+离子通道分别为m/z 415.2→m/z 163.1(依普利酮)、m/z 433.2→m/z 337.4(依普利酮酸)和m/z 393.1→m/z 355.1(内标地塞米松)。结果:建立的LC-MS/MS法测定血浆中依普利酮质量浓度在10.00~2 500 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,最低定量限为10.00 ng·mL^(-1),经方法验证符合生物样本分析的要求。12名受试者单次给药25、50、100 mg依普利酮后,C_(max)分别为(505.7±133.1)、(946.6±226.3)、(1 847±433)ng·mL^(-1),T_(max)分别为(1.3±0.5)、(1.3±0.8)、(1.6±0.8)h,t_(1/2)分别为(2.8±0.8)、(2.9±0.8)、(3.3±0.7)h,AUC_(0-24)分别为(2 310±728)、(4 889±1 808)、(9 691±2 733)ng·h·mL^(-1),AUC_(0-∞)分别为(2 395±749)、(5 051±1 789)、(9 788±2 751)ng·h·mL^(-1)。结论:建立的血浆中依普利酮LC-MS/MS测定法可用于依普利酮的临床药动学研究。Objectiv eplerenone in human e： To establish an LC-MS/MS method for the determination and pharmacokinetic study of plasma. Methods： EDTANa2 was added in plasma samples to alleviate the interconversion between eplerenone and eplerenone acid. The samples were separated by Wondasil-C18 （ 4.6 mm ×150 mm, 5 μm ） column with a linear gradient elution of a mobile phase consisting of 0.1% ammonium acetate solution and methanol both containing 0.05% formic acid after protein precipitation by chilly acetonitrile. The analytes were detectedby multiple reaction monitoring of the [ M＋H]＋ ions with transitions of m/z 415.2 → m/z 163.1, m/z 433.2 → m/z 337.4 and m/z 393.1 → m/z 355.1 for eplerenone, eplerenone acid and dexamethasone, respectively. Results： The established LC-MS/MS method showed good linearity within the concentration range of 10.00-2 500 ng. mL-1 with a LLOQ of 10.00 ng. mL-1 for eplerenone in human plasma. The method validation met the eriteria for bio-samples determination. The main pharmaeokinetic parameters of single-dose of 25,50 and 100 mg of eplerenone in 12 volunteers were as follows ： Cmax （ 505.7 ± 133.1 ）, （ 946.6 ± 226.3 ） and （ 1 847 ± 433 ） ng. mL-1, Tmax （ 1.3 ± 0.5 ）, （ 1.3± 0.8 ） and （ 1.6± 0.8 ） h, t1/2 （ 2.8 ± 0.8 ）, （ 2.9 ± 0.8 ） and （ 3.3 ± 0.7 ） h, AUC0-24 （ 2 310 ± 728 ）, （ 4 889± 1 808 ） and （ 9 691 ±2 733 ） ng.h.mL-1, AUC0-∞ （ 2 395 ± 749 ）, （ 5 051 ± 1 789 ） and （9 788 ± 2 751 ）ng. h. mL-1, Conclusion： The established LC-MS/MS method ean be applied in the pharmaeokinetic study of eplerenone.

关 键 词：醛固酮受体拮抗剂 依普利酮 依普利酮酸 地塞米松内标 血浆样品测定 人体药代动力学研究 液相色谱-串联质谱法 

分 类 号：R917[医药卫生—药物分析学]