Microtox(微毒)技术应用于红花注射液综合毒性检测  

The Microtox-Based Fast Test of Comprehensive Toxicity of Safflower Injection

作　　者：罗荔敏 鄢良春[2] 卫天喜 华桦[2] 祝勇军 赵军宁[2] Luo Limin Yan liangchun Wei Tianxi Hua Hua Zhu Yongjun Zhao Junning(China Resources 999 Pharmaceutical Co., Ltd. （Ya＇an）, Ya＇an 625000, China Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences, Chengdu, 610041, China)

机构地区：[1]华润三九(雅安)药业有限公司,雅安625000 [2]四川省中医药科学院中药药理毒理研究所/国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室/四川省道地药材系统开发工程技术研究中心/中药品质评价与创新中药研究四川省重点实验室,成都610041

出　　处：《世界科学技术-中医药现代化》2016年第11期1935-1941,共7页Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology

基　　金：科学技术部"重大新药创制"科技重大专项(2015ZX09501004-001-005):基于Microtox(微毒)测试的中药安全性快速检测;质量控制与风险预警新技术研究;负责人:赵军宁;国家自然科学基金委面上项目(81470180):基于Microtox技术的中药毒性分级原理与标准研究;负责人:赵军宁;国家中医药管理局公益性行业科研专项(201507004):与临床病症相关的确有疗效常用中药炮制技术与配伍减"毒"研究--苍耳子;负责人:华桦;四川省科技厅定向财力转移支付项目(2015ZYZF0087):红花注射液致不良反应物研究;负责人:祝勇军

摘　　要：目的:探索Microtox技术应用于红花注射液综合毒性检测。方法:以费氏弧菌为测试菌种,通过方法学考察确定最优检测体系及方法学可靠性;在最优检测体系条件下,对不同生产厂家所生产的红花注射液进行了发光菌综合毒性检测。结果:2 m L反应体系下,最优复苏液体积0.9 m L/支菌,每个待测样品加入最优的菌液体积50μL,最优检测时间10 min,最优p H范围5-10,且10 min时发光强度以80-120万为宜;重复性试验、中间精密度试验的相对标准偏差均小于15%;不同生产厂家A、B、C成品的EC50平均值分别为3.36%、5.58%、4.33%,具有显著性差异(P<0.05)。结论:红花注射液对费氏弧菌的毒性存在显著的浓度-效应关系,且不同生产厂家(包括原研单位在内)之间成品EC50值具有显著性差异,提示红花注射液成品生物学检测标准存在进一步提升的空间,应用Microtox技术检测红花注射液综合毒性并用于控制不同厂家成品质量的波动具有很好的应用前景。This study aimed at exploring a new method--microtox technology to evaluate the comprehensive toxicity of safflower injections from different drug manufacturers. In the experiment, we investigated the characteristic parameters of vibrio fischeri（CS234） under different conditions, and then locked the optimum parameters for safflower injection assay： recovery liquid volume 0.9 m L in freeze-dried vial, 50 μL bacteria suspension in each sample, and the detection time of 10 mins after adding the bacteria suspension. Under this optimum detection condition, we found that the EC50 values were 3.36%, 5.58% and 4.33%, being significantly different between 3 representative drug manufacturers（P 〈 0.05）. In conclusion, it was implied that the biological detection standards of safflower injections need improving, while the microtox-based fast test of the comprehensive toxicity of safflower injection showed a favorable and prospective application to controlling the product qualities of different manufacturers.

关 键 词：Microtox技术 发光细菌 红花注射液 综合毒性 

分 类 号：R285[医药卫生—中药学]