18ku转位蛋白选择性配体YL-IPA08对皮质酮诱导BV-2细胞凋亡的保护作用  

Protective effect of selective 18ku translocator protein ligand YL-IPA08 on BV-2 apoptosis induced by corticosterone

作　　者：蒋湘云[1,2,3] 张黎明[3] 夏登云[4] 孙树峥 李雷[1,2,3] 郭颖[2] 龚洁[2] 张有志[3] 王恒林[2] 李云峰[3] 

机构地区：[1]河北北方学院研究生部,河北张家口075000 [2]北京解放军第309医院麻醉科,北京100091 [3]军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850 [4]河北北方学院附属第一医院麻醉科,河北张家口075000

出　　处：《中国药理学与毒理学杂志》2017年第1期43-50,共8页Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology

基　　金：国家自然科学基金(81173036);国家自然科学基金(81001635);国家自然科学基金(30973516)~~

摘　　要：目的探讨18 ku转位蛋白TSPO选择性配体YL-IPA08对皮质酮诱导BV-2细胞凋亡的保护作用,并研究其可能的作用机制。方法选择性TSPO配体YL-IPA08 1~100 nmol·L^(-1)和(或)TSPO拮抗剂PK11195 100 nmol·L^(-1)预处理小胶质细胞系BV-2细胞2 h,加入皮质酮200μmol·L^(-1)继续培养24 h,分别用流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活,Western蛋白质印迹法检测TSPO蛋白表达水平,ELISA法检测细胞培养上清中四氢孕酮的水平。结果与溶剂对照组相比,YL-IPA08 1~100 nmol·L^(-1)与阳性化合物AC-5216一样能降低皮质酮处理的BV-2细胞的凋亡率(P<0.01),且100 nmol·L^(-1)时作用最为显著,该作用能被PK11195 100 nmol·L^(-1)所拮抗(P<0.05)。细胞活性检测显示,YL-IPA08 100 nmol·L^(-1)时能显著升高细胞活性(P<0.01),PK11195 100 nmol·L^(-1)处理会拮抗该作用(P<0.01)。Western蛋白质印迹和ELISA法结果显示,YL-IPA08 100 nmol·L^(-1)时能显著增加皮质酮处理的BV-2细胞TSPO蛋白的表达(P<0.05)并显著升高培养液中四氢孕酮的水平(P<0.05),PK11195 100 nmol·L^(-1)显著逆转该现象,降低四氢孕酮的水平(P<0.05)。结论 YL-IPA08显著抑制皮质酮诱导BV-2细胞的凋亡,表现出对小胶质细胞的保护作用,该作用与其增加TSPO蛋白的表达、升高四氢孕酮的水平密切相关。OBJECTIVE To investigate the protective effect of selective 18 ku translocator protein（TSPO） ligand YL-IPA08 on corticosterone（CORT）-induced apoptosis of BV-2 cel s and its potential mechanisms. METHODS BV-2 Cells were pretreated with selective TSPO ligand YL-IPA08 1-100 nmol·L（-1）and（or） TSPO antagonist PK11195 100 nmol·L-1for 2 h,and then co-incubated with CORT for another24 h. The apoptosis rate was measured by flow cytometry. CCK-8 kit was used to test BV-2 cell viability. The protein expression of TSPO was determined by Western blotting. The level of allopregnanolone was detected by ELISA kit. RESULTS In line with positive drug-AC-5216, the cell apoptosis rate decreased in YL-IPA08 1-100 nmol·L（-1）and CORT co-treatment groups（P0.01）, which was antagonized by PK11195 100 nmol·L（-1）treatment（P0.05）. Cell viability increased in YL-IPA08 100 nmol·L（-1）and CORT co-treatment groups（P0.01）, which was blocked by PK11195 100 nmol·L（-1）treatment（P0.01）.The expression of TSPO and the level of allopregnanolone（P0.01） were enhanced by YL-IPA08100 nmol·L-1pretreatment followed by CORT treatment. The enhancement of allopregnanolone level was blocked by PK11195 100 nmol·L（-1）treatment（P0.05）. CONCLUSION YL-IPA08 can protect BV-2cells from CORT induced apoptosis. The protective effect of YL-IPA08 may be conferred by the increasing level of TSPO expression and allopregnanolone.

关 键 词：YL-IPA08 18 ku转位蛋白 细胞凋亡 四氢孕酮 BV-2细胞 

分 类 号：R96[医药卫生—药理学]