重组抗IL-4R单链抗体的表达与检测  

作　　者：杨光勇[1] 郭海涛[1] 刘茜明 李慧[1] 王文佳[1] 何光志[1] 

机构地区：[1]贵阳中医学院,贵阳550002

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2017年第3期164-167,共4页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：2011年贵州省社会发展科技攻关项目(黔科合SY字(2011)3020);贵州省委组织部高层次人才科研条件特助经费项目(TZJF-2011年28号);2012年贵州省科学技术基金项目(黔科合[2012]2075号)

摘　　要：为了运用噬菌体展示技术对抗白细胞介素-4受体(IL-4R)特异性单链抗体进行表达与鉴定,试验提取了前期工作中经富集与筛选抗IL-4R单链抗体库而得到的特异性pCANTAB5E-sc Fv重组质粒,用NotⅠ和SfiⅠ双酶切鉴定样本并将质粒送上海英骏生物公司测序;利用pCANTAB-5E噬菌体展示系统(pCANTAB-5E、TG1、M13K07、HB2151)表达抗IL-4R单链抗体重组蛋白;通过SDS-PAGE和Western-blot分析单链抗体的表达情况及抗体的活性。结果表明:pCANTAB-5E噬菌体展示系统表达出的单链抗体重组蛋白分子质量在25~35 ku之间,28 ku左右,与测序结果预测的蛋白分子质量接近。说明成功表达了抗IL-4R单链抗体重组蛋白。

关 键 词：噬菌体展示技术 单链抗体 白细胞介素-4受体 重组质粒 重组蛋白 

分 类 号：Q939.48[生物学—微生物学]