全骨髓贴壁法离体培养大鼠骨髓间充质干细胞及其生物学特征鉴定  

作　　者：王荣[1] 李秀霞[2] 周胜虎[3] 于利明 李旭升[3] 

机构地区：[1]甘肃中医药大学临床医学院,甘肃兰州730000 [2]兰州大学基础医学院循证医学中心,甘肃兰州730000 [3]中国人民解放军兰州总医院关节外科,甘肃兰州730050

出　　处：《甘肃科技》2017年第4期103-105,26,共4页Gansu Science and Technology

摘　　要：验证全骨髓贴壁法离体培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)的可行性,并对所获细胞进行生物学特征鉴定。采用全骨髓贴壁法离体培养大鼠BMSCs,通过倒置相差显微镜进行不同阶段的细胞形态学观察。通过流式细胞术进行BMSCs表型鉴定。通过成骨诱导分化实验检验其分化潜能。原代BMSCs接种48h后充分贴壁。72h后,呈集落式克隆,单体形态呈长梭形、三角形及多角形。细胞融合至80%~90%后呈"鱼群"或"旋涡"状排列。传至第四代的BMSCs失去其特征性形态,单体大而铺展,主要呈不规则形。传至第二代的BMSCs经流式细胞术检测后即呈现CD44、CD90阳性表达,而CD45阴性表达。第二代BMSCs成骨诱导3周后,碱性磷酸酶染色呈阳性,茜素红染色可见大量矿化结节形成。全骨髓贴壁法简便易行,可高效地体外分离、纯化及扩增大鼠BMSCs,所获细胞具备BMSCs的生物学特征。

关 键 词：间充质干细胞 大鼠 鉴定 

分 类 号：R329[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]