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机构地区:[1]台州师范专科学校生化系,浙江临海317000
出 处:《植物学通报》2002年第4期452-456,503,共6页Chinese Bulletin of Botany
基 金:浙江省自然科学基金项目 ( 3992 0 3);浙江省教委科研计划项目 ( 1990 367)
摘 要:以改进SDS法抽提濒危植物七子花嫩叶总DNA ,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析 ,分别测试了镁离子 ,dNTP ,模板DNA含量 ,引物和DNA聚合酶量对反应结果的影响 ,通过各因子的组合研究 ,可知七子花RAPD分析较适宜的扩增条件是 :1 5μLPCR反应体积 ,1×Taq酶配套缓冲液 (1 0mmol/LTris·HClpH 9.0 ,50mmol/LKCl,0 .1 %TritonX_1 0 0 ) ,2 .5mmol/LMgCl2 ,2UTaq酶 (上海华美公司 ) ,1 0ng模板DNA ,2 0pmol引物 (上海Sangon公司 ) ;dATP、dCTP、dGTP、dTTP各 0 .1mmol/L。The DNA templates of Heptacodium miconioides extracted from young leaf were amplified by RAPD. Effects of the content of Mg 2+ , dNTP, DNA templates, primers and DNA polymerase on experimental results were tested and the optimal reaction system of RAPD for Heptacodium miconioides was determined as follows: 1×Taq polymerase corresponding buffer (10 mmol/L Tris·HCl pH 9.0,50 mmol/L KCl, 0.1% Triton X_100), 2.5 mmol/L MgCl 2, 2U Taq DNA polymerase, 10 ng template DNA, 20 pmol primer, 0.1 mmol/L dATP, dCTP, dGTP, dTTP separately in total 15 μL reaction volume.
分 类 号:Q943[生物学—植物学] Q949.781.2
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