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作 者:赵爱云[1,2] 齐萌[1,2] 江春雨[1,2] 井波[1,2]
机构地区:[1]塔里木大学动物科学学院,新疆阿拉尔843300 [2]兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔843300
出 处:《畜牧与兽医》2017年第5期98-102,共5页Animal Husbandry & Veterinary Medicine
基 金:国家自然科学基金项目(31160503;31560693);新疆生产建设兵团青年科技创新资金专项(2012CB023);兵团塔里木畜牧科技重点实验室开放课题(HS201108)
摘 要:为研究斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai)的入侵及免疫机制,从基于Gateway技术构建的孢子化卵囊c DNA原核表达文库中扩增出了微线蛋白5(MIC5)部分基因序列,融合表达、纯化了相应的GST-MIC5蛋白多肽,并对该融合蛋白进行了生物信息学分析。结果显示,获得的MIC5基因部分序列长552 bp,与参考序列的同源性高达99%;经原核表达、纯化,获得大小约46 ku的融合蛋白,与预测相符;生物信息学分析发现,目的蛋白含3个由半胱氨酸序列构成的Apple结构域,揭示其与虫体黏附和入侵宿主细胞相关;诱导表达并纯化了与虫体黏附和入侵宿主细胞相关的MIC5部分蛋白。本研究为深入探讨斯氏艾美耳球虫MIC5蛋白的功能奠定了理论基础。To investigate the invasion and immune mechanism of Eimeria Stiedai, an E. stiedai microneme 5 ( MIC5 ) sequence of 552 bp, which has 99% sequence homology with that of E. taneUa, was amplified from the prokaryotic cDNA expression library of the sporulated oo- cytes constructed using Gateway~ technology. Then the corresponding polypeptide was expressed and purified. The result showed that a fusion protein with an anticipated molecular weight of approximately 46 ku was obtained. Bioinformatics analysis revealed that the target protein con- tain Apple domains, including three cysteine residues that may be relevant with parasite adhesion and host cell invasion. Then the target frag- ment of E. stiedai MIC5 was induced to express and further purified. This study provides a basis for investigation of MIC5 function of E. stie- dai.
分 类 号:S855.9[农业科学—临床兽医学]
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