大头典竹ISSR反应体系建立与优化  

作　　者：瞿印权 徐雯[1] 沈露[1] 何天友[2] 魏建文[3] 荣俊冬[1] 郑郁善[1] 

机构地区：[1]福建农林大学林学院,福建福州350002 [2]福建农林大学艺术学院园林学院,福建福州350002 [3]福建省东山赤山国有防护林场,福建东山363400

出　　处：《江苏农业科学》2017年第10期34-39,共6页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：福建省科技重大专项(编号:2013NZ0001);福建省科技重大项目(编号:2010N5002)

摘　　要：以大头典竹叶片为材料,采用单因素分析法和正交设计直观分析法,对影响PCR扩增效果的Mg^(2+)、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA含量这5个PCR反应体系主要成分以及退火温度和循环次数进行筛选。通过研究建立了适合大头典竹的ISSR-PCR反应体系:20μL反应液中含2.5 mmol/L Mg^(2+),0.25 mmol/L dNTPs,1.25 U TaqDNA聚合酶,0.6μmol/L引物,10 ng模板DNA,2μL 10×Buffer,10.55μL ddH_2O。相应反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性45 s,54.5℃退火30 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。应用建立的优化反应体系成功地筛选出16条多态性较高的引物,表明该体系具有较高稳定性、重现性、适用性,可较好地应用于大头典竹不同地理种源间的遗传多样性研究。

关 键 词：大头典竹 ISSR 反应体系 优化 

分 类 号：S795.901[农业科学—林木遗传育种]