胶质瘤U251细胞外源基因瞬时转染方法的选择  

作　　者：呼格吉乐[1] 高乃康[1] 刘秉春[1] 袁建龙[1] 

机构地区：[1]内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050

出　　处：《山东医药》2017年第16期44-46,共3页Shandong Medical Journal

基　　金：内蒙古医科大学科技百万工程(YKD2015KJBW010);内蒙古医科大学青年创新基金资助项目(YKD2012QNX009)

摘　　要：目的选择一种将外源基因瞬时转入胶质瘤细胞的高效转染方法。方法以去内毒素真核表达载体DsRed2为外源基因,分别采用脂质体Lipofectamine2000转染法、脂质体Viafect转染法以及电转染法,将不同浓度的DsRed2质粒(0.25、0.5、1.0μg)转染入胶质瘤U251细胞(以下称胶质瘤细胞,细胞数量均为1.0×105个)。荧光显微镜下采用可见光、红色荧光滤镜观察细胞形态及红色荧光蛋白表达,紫外光滤镜下观察细胞核Hocest33342染色情况,计算转染效率。结果三种方法均能将质粒转染至胶质瘤细胞中,红色荧光蛋白表达效果均良好。转染后的细胞形态基本正常,但表达红色荧光蛋白与未表达红色荧光蛋白的细胞形态差异较大。相同质粒浓度下,电转染法转染后表达红色荧光蛋白的细胞数量多于脂质体Lipofectamine2000转染法、脂质体Viafect转染法。随着质粒浓度的升高,脂质体Viafect转染法和电转染法对胶质瘤细胞的转染效率逐渐升高。相同质粒浓度下,电转染法对胶质瘤细胞的转染效率均高于脂质体Lipofectamine2000转染法和脂质体Viafect转染法(P均<0.01)。结论电转染法对外源基因瞬时转染胶质瘤细胞的转染效率较高,并呈质粒浓度依赖性。

关 键 词：胶质瘤细胞 质粒 转染方法 电转染法 转染效率 

分 类 号：R34[医药卫生—基础医学]