应用CCK8法检测鸡淋巴细胞活性的检测最佳条件研究  

作　　者：刘素贞[1] 曹晓敏[1] 许丽娟[1] 白宇[1] 卢立志[2] 柴一秋[3] 

机构地区：[1]温州科技职业学院,浙江温州325006 [2]浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310000 [3]浙江省亚热带作物研究所,浙江温州325006

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2017年第7期212-214,共3页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：2015年浙江省新苗人才计划项目(2015R458001);浙江省教育厅高等学校访问工程师校企合作项目(FG2014197);浙江省重大优先项目(2008C12044-3)

摘　　要：为了研究应用CCK-8法检测鸡淋巴细胞增殖的体外培养最佳条件,试验设置了不同种板细胞数、血清浓度、培养时间、孵育时间和检测波长等条件对其进行比较研究。结果表明:1 750 r/min转速的改良鸡外周血淋巴细胞分离方法效果最佳;在体外增殖培养试验中,CCK-8加样4 h后在450 nm波长处检测OD值最理想,培养时间以44 h为最佳;在细胞数量一致的情况下,胎牛血清浓度为5%或者为10%差异不显著(P>0.05)。当细胞悬液浓度为1×10~6个/m L时,加入100,50,25,12.5μL不同细胞数,4组间比较均差异显著(P<0.05),并且随着细胞悬液浓度的增加OD值增加;最佳铺板细胞的细胞悬液浓度为2.0×10~6~3.0×10~6个/m L,取50~100μL为宜,即最佳细胞铺板数量控制在每孔1.5×10~5~2.0×10~5个/100μL。说明应用CCK-8法检测鸡外周血淋巴细胞活性的最佳条件除种板细胞数不同外,在检测波长、血清浓度、加样后孵化时间等方面与其他动物试验差别不大。

关 键 词：CCK-8法 鸡 外周血淋巴细胞 增殖活性 检测波长 血清浓度 OD值 

分 类 号：S854.43[农业科学—临床兽医学]