番石榴最适ISSR-PCR反应体系的建立与验证  

作　　者：宁琳[1] 陈豪军[1] 黄显雅[1] 潘祖建[1] 严霖 甘卫堂[1] 唐玉娟[1] 

机构地区：[1]广西壮族自治区亚热带作物研究所,南宁530001

出　　处：《中国南方果树》2017年第4期57-59,63,共4页South China Fruits

基　　金：农业部热带作物种质资源保护项目(16RZZY-25)资助

摘　　要：为更好地将ISSR标记应用于番石榴种质研究,以"维邦2号"番石榴DNA为筛选体系试验材料,采用单因子试验对ISSR-PCR反应中Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度、DNA浓度进行了优化;选用引物UBC810对9份番石榴种质进行PCR反应,选取"南宁本地番石榴实生2号"DNA作为模板对8条ISSR引物进行PCR反应,对优化扩增体系进行验证。结果表明,番石榴20μL最适ISSR-PCR反应体系为1.0mmol/L Mg^(2+),0.25mmol/L dNTPs,0.8μmol/L引物,0.2U Taq酶,10ng的DNA(2.0μL 10×Buffer,加入适量ddH2O至20μL)。验证试验得到的扩增产物条带多态性丰富,且特异性强、重复性好。试验确立的最适ISSR-PCR反应体系适用于番石榴的ISSR分子标记。

关 键 词：番石榴 ISSR-PCR 最适体系 

分 类 号：S667.9[农业科学—果树学]