组蛋白八聚体的装配及荧光标记检测体外组装核小体的效率  

作　　者：刘媛[1] 张凤慧[1] 赵宏宇[1] 蔡禄[1] 

机构地区：[1]内蒙古科技大学生命科学与技术学院,内蒙古包头014010

出　　处：《江苏农业科学》2017年第14期12-16,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:61072129;11547150);内蒙古自然科学基金(编号:2013MS0514)

摘　　要：基于影响核小体定位的DNA序列TA 10-bp周期性和R5Y5序列模体,设计6条对组蛋白亲和性不同的DNA序列,将其克隆到重组质粒中,分别命名为CS1~CS6。通过PCR扩增的方法,在引物上标记Cy3荧光信号分子,获得大量标有Cy3的目的序列;同时,从大肠杆菌中表达纯化了H2A、H2B、H3、H4共4种组蛋白,经复性装配成组蛋白八聚体,利用盐透析法将目的 DNA序列与组蛋白八聚体组装成核小体结构;经荧光信号检测,分析6条目的序列形成核小体的能力。结果发现,CS2、CS3形成核小体的能力较强,该结果与Trifonov EN提出的核小体在该模体上的精确定位基本吻合,该试验方法的建立对核小体结构及相关表观遗传学领域的研究具有一定的意义。

关 键 词：核小体 组蛋白 荧光标记 序列模体 体外组装 定位 

分 类 号：Q71[生物学—分子生物学]