猪流行性腹泻病毒变异毒株一步法SYBR Green I荧光RT-PCR检测方法的建立及应用  

作　　者：于新友 李天芝 

机构地区：[1]山东绿都生物科技有限公司

出　　处：《饲料与畜牧（规模养猪）》2017年第6期42-45,共4页

基　　金：山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队项目(SDAIT-08-17)

摘　　要：为了建立猪流行性腹泻病毒变异毒株快速、敏感的检测方法。本研究利用RT-PCR技术扩增出猪流行性腹泻病毒变异毒株S基因中298bp的保守序列,并克隆到pM D18-T载体中作为标准品制作标准曲线,建立了PEDV的SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达5.2×10~1拷贝,与猪流行性腹泻病毒经典毒株、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪蓝耳病毒、猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒均不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性。结果表明,建立的实时荧光定量RT-PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PEDV变异毒株的检测。

关 键 词：猪流行性腹泻病毒变异毒株 SYBR Green I 荧光定量RT-PCR 

分 类 号：S943[农业科学—水产养殖]