针对nsp9基因的siRNA在Marc-145细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响  

Influence of siRNA targeting nsp9 gene on replication of PRRSV in Marc-145 cells

作　　者：赵孟孟[1,2] 李华玮[3] 何健[1] 冯松林[2] 张雅[1] 张二芹[1] 张桂红[2] 

机构地区：[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 [2]华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室国家生猪种业工程技术研究中心,广东广州510642 [3]河南牧业经济学院生物工程学院,河南郑州450046

出　　处：《中国兽医学报》2017年第9期1648-1652,1669,共6页Chinese Journal of Veterinary Science

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31272564);公益性行业(农业)科研专项经费资助项目(201203039);国家生猪现代农业产业技术体系资助项目(CARS-36);河南省高等学校重点科研资助项目(15A230030);"十二五"农村领域国家科技计划课题资助项目;高致病性蓝耳病等重要家畜疫病新型疫苗研究与开发资助项目(2015BAD12B02)

摘　　要：为了验证猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)nsp9基因对PRRSV的复制影响,化学合成针对nsp9基因的siRNA,转染到Marc-145细胞中,接种PRRSV之后分别通过荧光定量和Western blot方法来测定病毒的滴度变化和表达情况。结果发现,转染siRNA的Marc-145细胞中病毒的滴度低于未转染特定siRNA的对照组,同时N蛋白的mRNA和蛋白水平均低于未转染特定siRNA的对照组。初步得出结论nsp9基因为病毒复制关键基因,针对nsp9基因的siRNA会在Marc-145细胞中抑制PRRSV的复制。In order to verify whether nsp9 gene of PRRSV have an influence on the replication of PRRSV,chemical synthesis siRNA special for nsp9 gene was transfected into Marc-145 cells, qPCR and Western blot were conducted to evaluate viral titer and expression after inoculated PRRSV, The results showed that viral titer in the Marc-145 ceils transfected with siRNA were lower than that of not transfected cells. Meanwhile,the mRNA and protein level were the same as the titer level. So nsp9 is a crucial gene for viral replication. SiRNA for nsp9 gene could inhibit the replication of PRRSV in Marc-145 cells.

关 键 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp9 复制 SIRNA 滴度 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]