黄艾美耳球虫单卵囊分离及PCR鉴定  

作　　者：顾小龙[1] 刘红彬[2] 方素芳[1] 刘贤勇 索勋[3] 崔平 

机构地区：[1]河北北方学院动物科技学院,河北张家口075000 [2]河北北方学院药学系,河北张家口075000 [3]中国农业大学动物医学院,北京100193

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2017年第9期194-196,298,共4页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：河北省教育厅项目(QN20131091);河北北方学院重大课题项目(ZD201308)

摘　　要：为了获得纯种黄艾美耳球虫,从张家口某兔场的兔粪中分离黄艾美耳球虫孢子化卵囊,单卵囊接种无球虫兔,以饱和盐水漂浮法收集子代卵囊,利用CTAB法提取黄艾美耳球虫卵囊基因组DNA,并根据Gen Bank中发表的艾美耳属球虫保守序列设计引物,PCR扩增ITS并测序,设计特异性引物鉴定黄艾美耳球虫。结果表明:黄艾美耳球虫ITS1序列长330 bp,5.8S r DNA序列长157 bp,ITS2序列长522 bp。在黄艾美耳球虫ITS1/2序列高变区设计种特异性引物,与大型艾美耳球虫和肠艾美耳球虫无交叉反应。说明建立的鉴定黄艾美耳球虫的PCR方法灵敏、特异。

关 键 词：家兔 黄艾美耳球虫 单卵囊分离 PCR ITS1—5.8SrDNA—ITS2 

分 类 号：S855.9[农业科学—临床兽医学]