猪A群轮状病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与初步应用  

作　　者：赵凤菊[1] 关淼[1] 李井春[1] 关乃鹏[1] 陈瑶[1] 赵晓彤[1] 

机构地区：[1]辽宁省动物疫病预防控制中心,沈阳110164

出　　处：《黑龙江畜牧兽医（下半月）》2017年第10期155-157,共3页

基　　金：辽宁省农业攻关及产业化项目"规模化猪场腹泻类疾病关键防控技术研究与示范"(2015202013)

摘　　要：为建立一种快速检测猪A群轮状病毒的检测方法,基于猪A群轮状病毒NSP4基因序列利用Premier 5.0软件设计并合成了一对特异性引物,建立了猪A群轮状病毒一步法RT-PCR检测方法,通过反复试验确定了引物的最佳退火温度为56℃,通过灵敏性试验确定了最低的检测浓度为13.17 pg/μL,通过特异性与稳定性试验表明该方法具有良好的特异性与稳定性,同时应用该方法对临床病料进行了检测,并选取扩增阳性样品进行了序列测定与分析,样品阳性率为90%(27/30),与Gen Bank中其他猪A群轮状病毒NSP4基因序列同源性均在98%以上。结果表明:该方法具有良好的灵敏性、特异性与稳定性,可以为猪A群轮状病毒病的快速检测和流行病学调查提供有效的技术手段。

关 键 词：猪 猪A群轮状病毒 一步法RT-PCR 方法建立 应用 

分 类 号：S852.659.4[农业科学—基础兽医学] S854.43[农业科学—兽医学]