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作 者:郭丽红[1,2,3] 徐娅 郤秋霞 李念 檀文涛 张学兰[4]
机构地区:[1]昆明学院/云南省高校特色生物资源开发与利用重点实验室,云南昆明650214 [2]昆明学院/昆明市滇池水生态恢复重点实验室,云南昆明650214 [3]昆明学院农学院,云南昆明650214 [4]昆明学院生命科学与技术系,云南昆明650214
出 处:《江苏农业科学》2017年第21期24-27,共4页Jiangsu Agricultural Sciences
基 金:国家自然科学基金(编号:31260061;31060039);云南省高校特色生物资源开发与利用重点实验室项目(编号:GXZD201601)
摘 要:为了研究拟南芥热激因子AtHsfA1a对低温胁迫下细胞程序性死亡(programmed cell death,简称PCD)中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific protease,简称Caspase)活性的影响,进一步确定拟南芥热激因子AtHsfA1a与低温胁迫中PCD的关系。以热激因子AtHsfA1a不同基因型(野生型、基因沉默型)的拟南芥为材料,首先获得单细胞,于4℃处理1 h后,测定热激因子AtHsfA1a的表达量,发现基因沉默型中AtHsfA1a的表达量低于野生型。接着用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,简称DAPI)进行染色,在荧光显微镜下观察细胞形态,结果表明,低温胁迫后野生型未出现凋亡小体,基因沉默型的细胞出现了细胞凋亡小体。最后根据荧光底物Ac-DEVD-p NA的断裂程度测定Caspase-3活性,结果发现,低温处理后的拟南芥Caspase-3活性明显增强,而AtHsfA1a基因沉默型拟南芥Caspase-3活性比野生型拟南芥的高,说明低温胁迫下拟南芥AtHsfA1a能够抑制Caspase-3蛋白酶的活性。研究结果初步表明,在低温胁迫下拟南芥热激因子AtHsfA1a可以通过抑制Caspase-3蛋白酶的活性而对细胞程序性死亡有一定的抑制作用,这对于揭示植物耐逆境反应机制具有重要意义。
关 键 词:拟南芥 热激因子AtHsfA1a 低温胁迫 细胞程序性死亡 CASPASE-3活性
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