多角体包裹型猪α干扰素在昆虫细胞中的表达  

作　　者：郭建军[1] 曾静[1] 袁林[1] 邱小忠[1] 

机构地区：[1]江西省科学院微生物研究所,江西南昌330096

出　　处：《江苏农业科学》2017年第23期41-44,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：江西省重大科技创新研究项目(编号:20124ACF01100);江西省科学院对外合作项目(编号:H2014004)

摘　　要：为了获得多角体包裹的重组猪α干扰素,应用Bac-to-Bac昆虫细胞杆状病毒表达系统,将多角体蛋白基因和编码成熟猪α干扰素的基因分别构建到p Fast Bac Dual载体的PH、P10启动子下,以多角体蛋白H1α-螺旋序列为信号肽。将构建质粒转化DH10BacTM感受态细胞进行同源重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染Sf9昆虫细胞获得重组病毒。通过间接免疫荧光、Western-Blot证明,多角体蛋白与猪α干扰素实现共表达,在信号肽引导下猪α干扰素被包埋进多角体;用微量细胞病变抑制法检测显示,多角体包裹的猪α干扰素有抗病毒活性,效价达到5亿U/mg以上。应用在昆虫细胞中表达的多角体包裹型猪α干扰素,在临床上为猪病毒性疾病的防治与治疗奠定了基础。

关 键 词：猪干扰素 多角体 杆状病毒表达 抗病毒活性 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]