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机构地区:[1]包头医学院基础医学与法医学院,内蒙古包头014040 [2]包头医学院药学院,内蒙古包头014040
出 处:《江苏农业科学》2017年第24期32-34,共3页Jiangsu Agricultural Sciences
基 金:国家自然科学基金(编号:81102760);内蒙古自然科学基金(编号:2015M0808)
摘 要:为利用简单重复序列区间(inter simple sequence repeat,简称ISSR)技术研究蒙古扁桃资源遗传多样性评价和种质资源鉴定,利用正交试验法进行L_(16)(4~5)正交设计,从Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶活性和模板DNA质量5种因素和4个浓度水平来优化蒙古扁桃ISSR-PCR反应体系。结果表明,最佳反应体系如下:在25μL反应体系中加入2.0 U Taq聚合酶,引物浓度0.80μmol/L,Mg^(2+)浓度2.0 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,模板DNA质量50 ng。对蒙古扁桃ISSR-PCR反应影响程度排序依次为Taq聚合酶活性>引物浓度>Mg^(2+)浓度>dNTPs浓度>模板DNA质量。
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