胡黄连苷Ⅱ对脑缺血再灌注损伤后电压依赖性阴离子通道1表达的影响  

Effect of picroside Ⅱ on the expression of mitochondrial VDAC1 after cerebral ischemia/reperfusion in rats

作　　者：李珊[1] 王婷婷[1] 翟丽[1] 邓文武 郭云良[1] 蒋家翔 

机构地区：[1]青岛大学附属医院脑血管病研究所,青岛266003 [2]山东省技术市场管理服务中心 [3]青岛大学护理学院

出　　处：《中华医学杂志》2018年第2期136-142,共7页National Medical Journal of China

基　　金：国家自然科学基金（81274116）

摘　　要：目的研究胡黄连苷Ⅱ对脑缺血再灌注损伤后线粒体电压依赖性阴离子通道1（VDAC1）表达的影响和意义。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，按随机数字表法将造模成功的70只大鼠分为假手术组、模型组、胡黄连苷组、VDAC1选择性抑制剂钌红组、钙红＋胡黄莲苷组、VDAC1选择性激动剂精胺组、精胺＋胡黄连苷组，每组10只。改良神经功能缺损评分（mNSS）评价动物神经行为功能；ELISA检测脑组织活性氧（ROS）含量；HE染色观察神经细胞形态；原位末端标记（TUNEL）检测神经细胞凋亡；免疫组化染色和Western印迹检测VDAC1和核酸内切酶（EndoG）表达水平。结果与假手术组比较，模型组大鼠mNSS评分明显升高[（9.6±1.9）分]，ROS含量增加[（47.6±2.7）U/ml]，皮质区变性细胞（0.79±0.04）和凋亡细胞增加（23.8±2.8），VDAC1（0.94±0.06）和EndoG[胞质（0.76±0.06），胞核（0.75±0.06）]表达均显著增强（P〈0.05）。与模型组比较，胡黄连苷组大鼠mNSS评分下降[（5.7±0.9）分]，ROS含量降低[（35.6±2.2）U/ml]，皮质区变性细胞（0.48±0.04）和凋亡细胞减少（14.5±2.1），VDAC1（0.63±0.06）和EndoG[胞质（0.34±0.05），胞核（0.31±0.06）]表达均显著降低（P〈0.05）。结论胡黄连苷Ⅱ可通过下调脑缺血再灌注后VDAC1表达而减少线粒体凋亡蛋白EndoG的释放，发挥神经保护作用。ObjectiveTo explore the effect of picroside Ⅱ on the expression of mitochondrial voltage-dependent anion channel 1 （VDAC1） in rats after cerebral ischemiareperfusion.MethodsA total of 70 Wistar rats models with middle cerebral artery occlusionreperfusion （MCAO/R） were randomly divided into the sham group, model group, picroside （Picr） group, ruthenium red （RuR） group, RuR＋ Picr group, Spermine （Sper） group, Sper＋ Picr group （n=10 per group）. Modified neurological severity scale （mNSS） was used to evaluated the neurobehavioral function, the expression of reactive oxygen species （ROS） in brain tissues were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）, the morphology of brain tissues was observed by hematoxylin-eosin （HE） staining, the apoptotic cells were counted by terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling assay （TUNEL）, and the expressions of VDAC1 and endonuclease G （EndoG） were determined by immunohistochemical assay and Western blot.ResultsCompared with the shame group, the mNSS scores （9.6±1.9）, the expression of ROS[（47.6±2.7）U/ml], the apoptosis of neuron（23.8±2.8）, and the expressions of VDAC1（0.94±0.06） and EndoG in cytoplasm （0.76±0.06） and nuclei（0.75±0.06）were enhanced in the model group （all P〈0.05）. The Picr group had obviously decreased mNSS scores （5.7±0.9）, ROS expression[（35.6±2.2）U/ml], number of apoptotic cells （14.5±2.1）, VDAC1 （0.63±0.06） and EndoG in cytoplasm （0.34±0.05） and nuclei （0.31±0.06）expressions compared to the model group （P〈0.05）.ConclusionPicroside Ⅱ could attenuate cerebral I/R injury by down-regulating the expression of VDAC1 and inhibiting the EndoG release from mitochondria into cytoplasm.

关 键 词：胡黄连苷Ⅱ 脑缺血再灌注 VDACl EndoG 大鼠 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]