新城疫病毒HN基因的原核表达载体的构建和鉴定  

作　　者：陈慧敏[1,2] 杨亚 郑培森 

机构地区：[1]河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003 [2]潢川县动物卫生监督所 [3]潢川县动物疫病预防控制中心

出　　处：《河南畜牧兽医（综合版）》2018年第2期10-11,31,共3页Henan Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine

摘　　要：试验旨在构建表达鸡新城疫病毒（NDV）HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板，通过设计的特异性引物PCR扩增出（NDV）HN基因片段，连接至pMD-18T载体，通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中，转化到感受态细胞Rosetta中，获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒，用lmmol／LIPTG诱导表达，并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示，HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达，表达产物大小约为90KD左右，western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。

关 键 词：新城疫 原核表达 SDS—PAGE western—blotting 

分 类 号：S852.659.5[农业科学—基础兽医学]