H9亚型禽流感病毒TaqMan MGB荧光RT-PCR检测方法的建立  

作　　者：宋权儒 王玉梅 赵燕 王磊 马龙 王晓亮 李知新 

机构地区：[1]宁夏动物疾病预防控制中心,宁夏银川750011

出　　处：《甘肃畜牧兽医》2017年第12期87-89,共3页Gansu Animal Husbandry and Veterinary Medicine

基　　金：宁夏农业科技支撑项目(2016003)

摘　　要：根据Gen Bank中发表的H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因保守序列设计合成一对特异性引物和一条Taq Man探针,建立了一种检测H9亚型AIV的荧光RT-PCR方法,利用该方法和商品化试剂盒对临床样本同时进行检测。结果显示,该方法可特异性检测H9亚型AIV,与H3和H5亚型AIV、新城疫病毒、鸭病毒性肠炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、减蛋综合征病毒等主要禽病病毒无交叉反应;该方法检测范围为10-1~10-5个拷贝数,相关系数R2=0.997。对3个不同浓度的RNA进行组间和组内重复性试验,每个浓度的Ct值变异系数均小于2.0%,具有良好的重复性。用本方法和商品化试剂盒对采集的349份野鸟粪便进行检测,两者具有高度的一致性(K=0.85),本研究建立的方法检测临床样本结果更接近真实值。本研究提供了一种快速、准确、敏感和特异的H9亚型AIV检测方法,可为临床诊断和流行病学调查提供可靠的检测依据。宁夏是中亚野鸟迁徙的主要旅居点,应加强野鸟和家禽群体的疫病监测,做到"早发现、早诊断、早处置"。

关 键 词：H9亚型禽流感病毒 荧光RT-PCR TAQ Man MGB探针 一致性检验 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]