全细胞生物催化合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯  

Whole Cell Catalytic Synthesis of Ethyl(R)-2-hydroxy-4-ethylbutyrate

作　　者：汪庆 侯泽林 王利群[2] 齐丽英 庞铭鑫 陈瑶[1,3] 张森 张建达 

机构地区：[1]河北工程大学河北省水污染控制与水生态修复工程技术研究中心,河北邯郸056038 [2]常州大学制药与生命科学学院,江苏常州213164 [3]河北工程大学能源与环境工程学院,河北邯郸056038

出　　处：《精细化工》2018年第2期207-212,共6页Fine Chemicals

基　　金：国家自然科学基金(41703088);河北省自然科学基金(D2017402109);河北省教育厅青年基金(QN2017035);邯郸市科技计划项目(1621212047);河北工程大学博士基金(20120110)~~

摘　　要：以2-羰基-4-苯基丁酸乙酯（OPBE）为碳源,从葡萄园土壤中筛选分离得到一株高选择性不对称还原OPBE为（R）-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[（R）-HPBE]的粘质红酵母（Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5）,利用1HNMR、GC-MS、液相色谱（LC）对产物结构进行了表征。构建了Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5全细胞催化还原OPBE合成（R）-HPBE的反应体系并对反应条件进行了优化。结果表明,最适催化反应条件为：在20 mL磷酸盐缓冲液（PBS）反应体系中,反应温度为35℃,pH=7.5,菌体质量浓度200 g/L,葡萄糖质量浓度30.0 g/L,金属离子Ca^（2＋）浓度3 mmol/L,底物OPBE浓度为20 mmol/L,反应时间12h,在此条件下,（R）-HPBE产率达82%,对映体过量值（e.e.）为99.9%。Ethyl （R） -2-hydroxy-4-ethylbutyrate [ （R） -HPBE ] was prepared by asymmetric reduction of ethyl 2-oxo-4-phenylbutyrate （OPBE） with a newly isolated Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5 from vineyard soil samples as catalyst. The product was characterized by I I-INMR, GC-MS and LC. The reaction conditions of Rhodotorula mucilaginosa CCZU-G5 whole cell catalytic synthesis of （R）-HPBE were investigated. The results showed that under the optimum conditions of 35 ℃, pH 7.5, cell concentration 200 g/L, mass concentration of glucose 30 g/L, Ca2＋ concentration 3 mmol/L and OPBE concentration 20 mmol/L, the yield of （R）-HPBE reached up to 82% and the enantiomeric excess （e. e. ） value of product reached 99.9% in 20 mL PBS reaction system,after 12 h of reaction.

关 键 词：(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯 粘质红酵母 全细胞催化 不对称还原 筛选 生物工程 

分 类 号：TQ464.8[化学工程—制药化工] Q55[生物学—生物化学]