表达IP10基因重组新城疫病毒的拯救  

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作  者:郭顺利 谢美玉 宾晓芸 石明霞 陈安宁 陈思宇 周素芳[1] 

机构地区:[1]广西医科大学,南宁530021

出  处:《山东医药》2018年第5期29-31,共3页Shandong Medical Journal

基  金:国家自然科学基金资助项目(81460432;81572994);广西自然科学基金资助项目(2015GXNSFDA139017);广西科学研究与技术开发计划项目(15104001-7);广西南宁青秀区科学研究与技术开发计划项目(2014S03)

摘  要:目的拯救携带IP10基因的重组新城疫病毒(r NDV-IP10)。方法用重组酶将IP10基因插入r NDV质粒,将重组BRN-FL-IP10质粒和辅助质粒共转染稳定表达T7RNA聚合酶的BSR-7细胞进行病毒拯救。用鸡红细胞检测重组病毒的血凝效价;用NDV及r NDV分别感染鸡胚成纤维细胞,检测病毒的生长动力学;用NDV及r NDV分别感染乳仓鼠肾细胞(BHK-2细胞),间接免疫荧光技术检测IP10蛋白的表达;将r NDV-IP10重组病毒感染人肝癌细胞低转移株(MHCC-97L),Western blotting法检测细胞中IP10蛋白表达。结果鸡红细胞血凝效价为阳性,重组病毒r NDV-IP10的生长特征与亲本NDV相比相似。感染了r NDV-IP10的BHK-2细胞具有特异性荧光,感染了r NDV-IP10的MHCC-97L细胞具有特异性条带。结论成功拯救出能够表达IP10基因的重组病毒r NDV-IP10。

关 键 词:溶瘤病毒 新城疫病毒 干扰素γ诱导蛋白10 病毒拯救技术 

分 类 号:R473.73[医药卫生—护理学]

 

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