侵袭性大肠埃希菌IpaC的表达和纯化与检验学研究  

作　　者：刘庆权 荣阳 刘晓华 

机构地区：[1]辽宁省辽阳市新城医院检验科,辽宁辽阳111000 [2]辽宁省辽阳市中心医院医务处,辽宁辽阳111000 [3]辽宁省辽阳市中心医院检验科,辽宁辽阳111000

出　　处：《中国医药指南》2018年第6期19-20,共2页Guide of China Medicine

摘　　要：目的研究分析侵袭性大肠埃希茵的发病机制,表达和纯化侵袭性大肠埃希茵毒力蛋白IpaC与临床意义。方法将含有ipaC基因的pET32a-ipaC表达质粒载体转化大肠杆菌BL21(λDE3),在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,对诱导后的表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIAexpressionitsTM蛋白纯化系统纯化目的蛋白。结果诱导后的表达产物经SDS-PAGE发现有一相对分子量约为63 kD的条带,其含量约占总蛋白量的13%,对目的蛋白进行纯化后发现,以400 mmol/L咪唑洗脱液洗脱时效果最为理想,纯度可达90%以上。结论 pET32a-ipaC重组表达质粒转化大肠杆菌B121(λDE3),可稳定、高效地表达目的蛋白;QIAexpressionistTM蛋白纯化系统是一种简便、高效的纯化系统,可获得高纯度的目的蛋白。

关 键 词：侵袭性大肠埃希菌 毒力蛋白(IpaC) 原核表达蛋白 纯化 

分 类 号：R378.21[医药卫生—病原生物学]