气肿疽梭菌CctA基因真核表达载体的构建与鉴定  

作　　者：张皓[1] 段雪岩 张永佳[1] 车达 邓文学 李成辉[1] 关如婷 金鑫[1] 

机构地区：[1]延边大学农学院,吉林延吉133000 [2]中国农业大学,北京100193 [3]延边州动物疫病预防控制中心,吉林延吉133000 [4]临沂市农业学校,山东临沂276000

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2018年第5期142-144,共3页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：吉林省教育厅“十二五”科学技术重点项目(吉教科合字[2014]第2号)

摘　　要：为了构建气肿疽梭菌细胞毒素A（CctA）基因真核表达载体,探讨制备安全有效气肿疽核酸疫苗的可行性,试验根据NCBI上气肿疽CctA基因序列,通过Primer Premier 5.0设计了1对特异性引物用于基因扩增,将PCR扩增的CctA基因克隆至pMD19-T载体构建重组质粒pMD19-T-CctA,对测序正确的基因进行序列分析后亚克隆至pVAX-1真核表达载体,并对构建的pVAX1-CctA真核表达质粒进行PCR和双酶切鉴定。结果表明：成功扩增了CctA基因目的片段,并获得了与预期大小相符的重组质粒pMD19-T-CctA和真核表达质粒pVAX1-CctA。说明试验成功构建了气肿疽CctA基因真核表达载体。

关 键 词：气肿疽梭菌 CctA基因 真核表达 载体 构建 鉴定 

分 类 号：S852.616.3[农业科学—基础兽医学] Q782[农业科学—兽医学]