PCR-RFLP技术与结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术对HBV拉米夫定耐药基因检测效果分析  

作　　者：卜范峰 朱晓艳[2] 彭德志 王睿 田欣欣 王燕[3] 周永坤[3] 

机构地区：[1]济南金域医学检验中心,济南250101 [2]山东省疾病预防控制中心 [3]山东中医药大学附属医院

出　　处：《山东医药》2018年第8期60-63,共4页Shandong Medical Journal

基　　金：山东省自然科学基金资助项目(ZR2015HL110)

摘　　要：目的分析PCR-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术检测HBV拉米夫定耐药基因的效果。方法采用PCR-RFLP技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术检测186例份乙肝血清标本拉米夫定耐药HBV DNA聚合酶204、180位点基因突变情况,并进行DNA测序验证。结果两种方法在HBV DNA聚合酶204位点均检出YIDD、YVDD、YMDD/YIDD、YMDD/YVDD、YIDD/YVDD突变类型,未检测出YSDD突变类型,检测结果与DNA测序验证结果比较差异均无统计学意义(χ~2=2.101、1.614,P均>0.05)。两种方法在HBV DNA聚合酶180位点均检出L180M、L180M+M204I、L180M+M204V突变类型,检测结果与DNA测序验证结果比较差异均无统计学意义(χ~2=0.054、1.614,P均>0.05)。结论 PCR-RFLP技术和结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术均可用于HBV拉米夫定耐药基因突变检测,但后者更适合大规模耐药基因突变筛查。

关 键 词：乙型肝炎病毒 拉米夫定耐药基因 DNA聚合酶基因突变 PCR-限制性片断长度多态性技术 结合SYBR GreenⅠ荧光染料的实时荧光PCR技术 

分 类 号：R373.2[医药卫生—病原生物学]